一、三先三后原则
①观察图像时,需要先使用低倍镜后使用高倍镜,两者不可以颠倒;②使用低倍镜前要移动镜筒到合适位置,在移动的过程中先注视物镜,当其与装片距离约为0.5cm时,再注视物镜;③低倍镜调焦时,先使用粗准焦螺旋,再使用细准焦螺旋,但在高倍镜调焦时,严禁使用粗准焦螺旋,只可以使用细准焦螺旋
二、放大倍数与视野亮度的关系
低倍镜时,视野相对比较明亮,转用高倍镜时,视野的亮度会降低,所以要适当调大光圈或者将反光镜换为凹面镜,对于观察颜色比较深的细胞,视野的亮度要求也比较高,这样才能观察清晰,但是对于细胞本身颜色比较浅或者倾向于无色时,要在视野亮度比较低的情况下观察。
三、玻片的移动和物象的移动
由于显微镜成像是经过物镜和目镜两次放大后形成的倒立虚像,物象在视野中的移动方向和装片的移动方向是相反的,据此,如果所要观察的细胞不在视野中央,则偏向哪个方向,应该向哪个方向移动,比如所要观察的细胞在实视野的左上角,则应该将装片朝着左上角移动,才可以将细胞移动到视野中央,即在哪个方向朝哪个方向移动。不过对于细胞质中某细胞器的顺时针或者逆时针流动,则和真实情况一样,观察为顺时针,则真实为顺时针。
四、视野中污点的判断
在显微镜观察中,如果发现有污点,需要判断污点是在目镜、物镜或者是在装片上,一般的操作是先移动目镜,观察污点是否移动,如果移动,则是在目镜上,如果不移动,再尝试转动物镜,看下是否移动,如果仍然没有结果则移动装片进行确认,确认的顺序是目镜→物镜→装片,一般不要轻易先移动装片,不然要重新调整观察。
五、关于显微镜的放大倍数
显微镜的放大倍数等于目镜的放大倍数乘以物镜的放大倍数,而这个总的放大倍数指的是被观察样品的长度和宽度,并不是面积,面积则是长和宽相乘,对此需要理解视野中一行相连的细胞如果共有64个,当放大倍数增加4倍时,视野中应该还可以观察到16个细胞,但是如果视野中64个细胞为充满整个视野的分布,此时总的放大倍数提升4倍,*后可以观察到应该是4个,因为一行相连只需考虑一个维度的增加,而充满视野则需要思考64个细胞组成的面积会因为放大倍数的增加而变小。
六、高倍镜的使用
遵照先低倍后高倍的原则,需要先在低倍镜下观察清楚以后,再换用高倍镜,另外换用高倍镜前,需要将所要观察的物象移动到视野中央,以防止换用高倍镜后物象移出视野而观察不到;换用高倍镜时可以直接转动转换器,无需提升镜筒,虽然高倍镜会因为镜头较长距离装片更近,但正确的操作不用担心会触碰装片。换用高倍镜后,如果视野不够清晰,则只需要调节细准焦螺旋,通常来说换用高倍镜后视野会变暗,此时可以通过光圈或者反光镜的调整来增加亮度。
七、关于目镜和物镜
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