关于显微镜的分类

显微镜是由一个透镜或几个透镜的组合构成的一种光学仪器，是人类进入原子时代的标志。主要用于放大微小物体成为人的肉眼所能看到的仪器。

 

显微镜主要分为光学显微镜和电子显微镜。

 

一、    光学显微镜

 

它是在1590年由荷兰的詹森父子所首创。光学显微镜可把物体放大1600倍，分辨的*小极限达0.1微米。

 

光学显微镜通常由光学部分、照明部分和机械部分组成。光学部分*为关键，由目镜和物镜组成。

 

光学显微镜的种类很多，主要有明视野显微镜（普通光学显微镜）、暗视野显微镜、荧光显微镜、相差显微镜、共聚焦显微镜、偏光显微镜、倒置显微镜等。

 

工作原理：

 

光学显微镜主要由目镜、物镜、载物台和反光镜组成。

 

目镜和物镜都是凸透镜，焦距不同。物镜的凸透镜焦距小于目镜的凸透镜的焦距。物镜相当于投影仪的镜头，物体通过物镜成倒立、放大的实像。目镜相当于普通的放大镜，该实像又通过目镜成正立、放大的虚像。经显微镜到人眼的物体都成倒立、放大的虚像。反光镜用来反射，照亮被观察的物体。反光镜一般有两个反射面：一个是平面镜，在光线较强时使用；一个是凹面镜，在光线较弱时使用，可会聚光线。

 

分类：

 

1、暗视野显微镜

 

暗视野显微镜由于不将透明光射入直接观察系统，无物体时，视野暗黑，不可能观察到任何物体，当有物体时，以物体衍射回的光与散射光等在暗的背景中明亮可见。在暗视野观察物体，照明光大部分被折回，由于物体(标本)所在的位置结构，厚度不同，光的散射性，折光等都有很大的变化。

 

暗视野显微镜常用来观察未染色的透明样品，例如检查苍白螺旋体，这是一种病原体检查，对早期梅毒的诊断有十分重要的意义。这些样品因为具有和周围环境相似的折射率，不易在一般明视野之下看的清楚，于是利用暗视野提高样品本身与背景之间的对比。

 

这种显微镜能见到小至4~200nm的微粒子，只能看到物体的存在、运动和表面特征，不能辨清物体的细微结构。

 

2、荧光显微镜

 

荧光显微镜是以紫外线为光源， 用以照射被检物体， 使之发出荧光，沧州欧谱 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。

 

萤光显微镜需在标本的照明光中，选择出特定波长的激发光，以产生荧光，然后必须在激发光和荧光混合的光线中，单把荧光分离出来以供观察。因此，在选择特定波长中，滤光镜系统，成为极其重要的角色。

 

荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光，荧光显微镜*是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。

 

3、相差显微镜

 

相差显微镜是荷兰科学家Zernike于1935年发明的，用于观察未染色标本的显微镜。一般由于被检物体（如不染色的细胞）所能产生的相差太小，肉眼很难分辨，只有在变相差为振幅差（明暗差）之后才能被区分。而相差显微镜通过改变这种相位差，并利用光的衍射和干涉现象，把相差变为振幅差来观察活细胞和未染色的标本。

 

相差是指同一光线经过折射率不同的介质其相位发生变化并产生的差异。相位指在某一时间上，光的波动所达到的位置。

 

相差显微镜和普通显微镜的区别是：用环状光阑代替可变光阑， 用带相板的物镜代替普通物镜，并带有一个合轴用的望远镜。

 

4、共聚焦显微镜

 

共聚焦显微镜是一种利用逐点照明和空间针孔调制来去除样品非焦点平面的散射光的光学成像显微镜，相比于传统成像方法可以提高光学分辨率和视觉对比度。

 

共聚焦是从一个点光源发射的探测光通过透镜聚焦到被观测物体上，如果物体恰在焦点上，那么反射光通过原透镜应当汇聚回到光源。

 

激光扫描共聚焦显微镜[Confocal Laser Scanning Microscope(CLSM或LSCM)]在反射光的光路上加上了一块半反半透镜(dichroic mirror)，将已经通过透镜的反射光折向其它方向，在其焦点上有一个带有针孔(Pinhole)，小孔*位于焦点处，挡板后面是一个光电倍增管(photomultiplier tube，PMT)。其意义是：通过移动透镜系统可以对一个半透明的物体进行三维扫描。
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