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可见分光光度计，是用于检测和跟踪记录被测物质对可见光的吸光度并进行定量分析的仪器设备。
工作原理
溶液中的物质在可见光的照射激发下,产生对光吸收的效应,这种吸收是具有选择性的。各种不同的物质都有各自的吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系,即符合朗伯一比尔定律。
光吸收示意图
液的光程长不变时,透过光是根据溶液的浓度而变化的,可见分光光度计的基本原理是根据上述物理光学现象而设计的。
仪器的结构
1.72型分光光度计的结构
72型分光光度计是由磁饱和稳压器、单色器和检流计三大部分组成。使用时,应先把这三部分用导线按图3-11接好。
将单色器与稳压器的输出接线柱5.5V或10V连接,再按照导电片上套管的颜色,把单色器与检流计连接,红色套管的导电片接在“十”号处,绿色套管的导电片接“一”号处,第三个导电片接地线。稳压器和检流计分别接220V电源。
分光光度计
2.722型光棚-分光光度计的结构
722型光栅分光光度计,采用自准式色散系统和单光束结构,色散元件为衍射光栅,使用波长为330~800nm数字显示读数还可以直接测定溶液的浓度。其外形如图3-12所示。
分光光度计仪器外型
仪器的使用
1.72型分光光度计的使用方法
(1)接通电源前,应先使稳压器、检流计和单色器的电源开关均处“关”的位置。光量调节器逆时针转至最小位置,单色器光闸门拨到黑点,然后把稳压器和检流计接上220V交流电源。
(2)将检流计电源开关打开,分挡开关由“断”拨至“直接”或“X1”档,指示光点出现在标尺上,用零位调节器将光标线准确地调至透光度标尺的“0”点上。
(3)打开稳压器和单色器的电源开关,把光闸门拨到“红”点上,再沿顺时针方向旋转光亮调节器,使检流计的指示光标线到达标尺上透光度100%处附近,预热10min后,待光标稳定后再开始使用。(4)把波长调节器调节到需要的波长处。
(5)将单色器的光闸门拨到“黑”点处,再一次核对检流计零位(即透光度为“0”处)。
(6)将盛空白溶液的比色皿放人比色皿架第一格中,其余=格放入待测溶液,盖上暗箱盖,将空白溶液推入光路(拉杆推到底)。把光闸门拨到“红”点上,轻轻调节光量调节器,把光标线准确地调至透光度“100”的读数上。
(7)把拉杆抽出一格,使有色溶液进入光路,光标线所指的A值就是该溶液的吸光度,再依次测定其他溶液。
(8)测定完毕,取出比色皿把溶液倒掉,用蒸馏水冲洗干净,吸干,放回比色皿盒子内。全部旋钮和开关恢复到使用前的状态,切断电源,把仪器罩好。
注意:
1)在接通电源之前,应检查各个调节旋'题是否均在起始位置,然后再打开电源开关。仪器停止工作时,必须把开关放在“关”上再切断电源。
2)只要空白溶液的透光度能调到“100”,单色器的电源电压应用5.5V,不用10V。这主要是延长光源灯的寿命,降低单色器的温度。
3)检流计背面有两个电源插孔,分别标有“220V”和“6V”。若用220V交流电源,则导线插头应橋入“220V”孔内,者用6V直流电源,则导线插头应插入“6V”孔内,不能插错。否则将把仪器烧坏。
4)在仪器使用过程中,应注意保护光电池,選免长时·间照射而疲劳。当取换溶液和记录读数后.应及时将光闻门拔到“黑”点,切断入射光。
5)应注意保护比色皿的透光面的光洁。使用时只能用手拿毛玻璃面,勿拿透光面。據拭整外溶液时只能用镜头纸。
6)比色皿盛放溶液不能超过其高度的4/5,以免溶液溢入机件内部。
2.722型光柵分光光度计使用方法
(1)在接通电源前,应对仪器的安全性进行检査,电源线接线应牢固,接地线通地要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再接通电源。
(2)将灵敏度派或调至“1”挡(放6倍率最小)。调波长调节器至所需波长。
(3)开启电源开关,指示灯亮,选择开关置于''T”,调节透光度''100%”旋钮,使数字显示100.0”左右,预热20min。
(4)打开吸收地暗室盖(光门自动关闭),调节“0”旋钮,使数字显示为“00.0”,盖上吸收地盖,将参比溶液置于光路,使光电管受光,调节透光度“100%”旋钮,使数字显示为“100.0”。
(5)如果显示不到“100”,则可适当增加电流放大器灵敏度挡数,但应尽可能使用低挡数,这样仪器将有更高的稳定性。当改变灵敏度后必须按重新校正“0”和“100”。
(6)按(4)连续几次调整“00.0”和“100”后,将选择开关置于“A”,调节吸光度调零旋钮,使数字显示为“.000”。然后将待测溶液推入光路,显示值即为待测样品的吸光度值A。
(7)浓度c的测量。选择开关由“A”旋至“c”,将标准溶液推入光路,调节浓度旋钮。使得数字显示值为已知标准溶液浓度数值。将待测样晶溶液推人光路,即可读出待测样品的浓度值。
(8)如果大幅度改变测试波长时,在调整“00.0”和“100”后稍等片刻(因光能量变化急剧,光电管受光后响应缓慢,需一段光响应平衡时间),当稳定后,重新调整“00·0”和“100”即可工作。
注意:
1)使用前,使用者应该首先了解本仪器的结构和原理,以及各个旋钮之功能。
2)仪器接地要良好,否则显示数字不稳定。
3)仪器左侧下角有一只干操剂筒,应保持其干燥,发现干操剂变色应立即更新或烘干后再用。
4)当仪器停止工作时,切断电源,电源开关同时切断,并章好仪器。
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